质粒制备
近年来，豪利777科技为科研院校、生物技术和生物制药领域的客户提供全面的质粒DNA制备服务。我们开发并完善了质粒制备的生产线，通过对过程和最终产品的严格管控，确保产品高质量。全部的质粒生产过程不含有动物材料，同时可将内毒素含量控制在较低水平（<5EU/mg），满足各领域客户多样化的下游应用，如转染、抗体制备、疫苗和基因治疗研究等。
除此之外，我们还提供完整、详细的实验记录，保证跟踪和监控整个生产过程；项目管理团队将监控项目全程，确保按时交付。同时，交付产品会有严格的质量控制，包括序列验证、限制酶酶切和内毒素分析等。
服务优势
实验流程
QC检验
我们拥有严格的质量控制标准保证质量稳定，降低各批次间差异性，满足客户对高质量质粒的需求。
| QC项目 | 检测标准 | 检测方法 |
| 外观 | 清澈透明 | 视觉检测 |
| A260/280 | 1.80~2.00 | 紫外分光光度计 |
| 浓度 | 5±0.05 mg/ml | 紫外分光光度计 |
| 超螺旋比例分析 | >95% | 琼脂糖凝胶密度扫描 |
| RNA残余 | 未检出 | 琼脂糖凝胶视觉检查 |
| 基因组DNA | 未检出 | 琼脂糖凝胶视觉检查 |
| 无菌验证 | 48h LB培养基不长斑 | 取0.1 mg样品在LB板孵育48h |
| 限制性酶切分析（可选） | 无杂带 | 酶切后，琼脂糖凝胶电泳分析 |
| 测序验证（可选） | 正确 | DNA测序 |
| 内毒素分析（可选） | <5EU/mg | 内毒素分析试剂盒 |
服务项目
| 研究级别 | 应用级别 | 临床前研究级别 | |
| 内毒素水平 | — | < 100EU/mg/<30EU/mg/<5EU/mg | < 100EU/mg/<30EU/mg/<5EU/mg |
| 质量 | 0.1 mg到g | 0.1 mg到g | 1mg到500mg |
| 周期 | 3个工作日起 | 7个工作日起 | 15个工作日起 |
| QC验证 | 基础QC验证项目 | 基础QC验证项目以及无菌验证、限制性酶切分析和测序验证 | 详细实验记录，QC验证项目以及无菌验证、限制性酶切分析和测序验证 |
| 应用方向 |
1.各种分子生物学的研究和生产，基因克隆，PCR模板，基因文库制作， DNA marker等 2.瞬时基因表达，生产少量的研究用蛋白 3.高等动植物基因改造的工具，基因编辑的工具 4.质粒构建的文库用于大规模基因组研究 5.基因存储 |
1.转染实验少量表达目标蛋白，瞬时表达蛋白 2.构建细胞株，长期大量的生产蛋白 3.包装病毒 4.基因治疗的研究 5.超长期基因存储 |
1.细胞治疗的原材料 2.包装病毒 |
| 发货形式 | 质粒DNA，COA文件，QC报告 | ||
备注：豪利777科技提供质粒的上游服务，如基因合成、亚克隆和载体构建等，满足客户的多样化需求。如果质粒已经构建完成，您需要提供超过100ng的DNA模板（稀释于ddH2O或者TE溶液）、克隆或者甘油菌。
案例分析——制备转染级别质粒
方法
1.质粒转化后挑取单克隆菌落进行培养；
2.抽提菌液进行酶切及测序验证，对符合要求的质粒进行大批量接菌抽提；
3.对各批次抽提质粒进行酶切验证，无误后混合所有抽提质粒；
4.对大抽质粒进行去内毒素处理，48h细菌检测。
结果
1.内毒素检测结果为阴性对照不凝固，阳性对照凝固，测试稀释样品不凝固，标准品不凝固，证明去内毒素处理成功。
2.48h无抗培养基均不长斑，通过无菌检测通过。
图1. 内毒素检测，从左至右依次为阴性对照，阳性对照，测试稀释样品，内毒素检测标准品5EU/mg
图2. 细菌检测结果比对
相关服务
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