CRISPR-Cas9基因编辑技术的出现为哺乳动物模型构建提供了简便、快速的方法，也为基因疾病的治疗提供新思路、新方法。 豪利777科技继质粒DNA后全新推出CRISPR RNP介导的细胞基因编辑服务：平台依托先进的技术和经验丰富的科研团队，为您打造从方案设计、sgRNA设计及化学合成、高活性重组Cas9蛋白，RNP复合物组装到敲除细胞系构建的全流程服务。
服务流程
服务优势：方案设计-合成-细胞系构建一体化服务
- 设计精准：专有设计算法，全模式物种CRISPR sgRNA设计
- 合成平台：化学合成修饰化的sgRNA更稳定，纯度＞99%
- 重组Cas9蛋白：活性检测，纯度＞99%
- 周期：周期短，最快至2周交付
- 定制化服务：根据客户需求制定个性化方案，定期反馈项目进度，交付详细的CoA文件。
服务详情
| 服务项目 | 交付内容 | 交付周期 |
|---|---|---|
| 方案设计 |
专业的分析报告 设计序列 |
咨询 |
| 合成与组装 |
化学合成修饰化的sgRNA 高活性、高纯度的Cas9蛋白 RNP复合物组装 |
咨询 |
| 敲除细胞系构建 |
多克隆细胞群或单克隆细胞株 提供细胞基因型复检、扩增及冻存 |
咨询 |
| 验证 |
DNA水平检测 蛋白水平检测 |
咨询 |
豪利777科技案例
1、利用RNP下的双sgRNA编辑法，实现基因DNA水平片段敲除
案例：对X细胞的A基因进行Exon1-13的片段敲除（KO）
（1）在需求敲除片段两端分别设计1条高靶向的sgRNA序列，如下图：
（2）将gRNA-A1、gRNA-A2进行化学修饰合成后分别与Cas9蛋白组装成RNP，转染至X细胞进行A基因片段序列敲除；
（3）敲除结果检测如下：
DNA水平-Sanger测序显示，A基因序列已被敲除，结果如下：
细胞表型检测如下图：A为正常细胞，B为A基因敲除后的突变细胞形态，表明A基因被敲除。
2、RNP敲除效率远超传统质粒法
案例：以AAVS1位点敲除为例，比较质粒（DNA）与RNP的敲除效率
（1）将AAVS1-sgRNA1序列构建带有Cas9的载体中，转染细胞后提取基因组DNA，以基因组DNA为样本进行Sanger测序并结合Synthego ICE分析软件检测，结果显示敲除率为14%；
（2）将AAVS1-sgRNA1 RNP复合物转染细胞后进行如（1）所述检测，结果显示敲除效率为69%；
（3）敲除效率比较（如下图），结果显示RNP敲除效率是质粒法的4-5倍，显著高于质粒法。
服务订购与咨询
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